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試劑盒提取的原則

 更新時間:2018-07-30 點擊量:1400
   試劑盒提取的原則
  試劑盒的用途:用固相化的、已標記的餌蛋白或標簽蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),從細胞裂解液中釣出與之有相互作用的蛋白質。酵母雙雜交后,驗證已知的“誘餌”蛋白與釣出蛋白或已純化的相關蛋白間的相互作用關系。從體外轉錄或翻譯體系中檢測出蛋白質相互作用。
  試劑盒特點:提供了可用于發現蛋白質相互作用的一套完整、易用、經濟的方案。用普通的試驗儀器和試劑(如離心機、Mini-Gel、蛋白質染色)即可完成整個實驗。適用于單個或多個樣品。靈活的“誘餌-捕獲”方式,鹽離子、變性劑濃度可調,對于弱的蛋白質相互作用也適用。一天之內“捕獲”和檢測可能與“誘餌”蛋白相結合的蛋白。回收相互作用的蛋白質復合物。
  試劑盒配有進行分析或測定所必需的全部試劑的成套用品,操作方便,而且排除的人為配置藥品的誤差,因為全部試劑都是成套出現,使操作更加標準,不會有浪費的現象。
  試劑盒提取的原則
  1、保證核酸一級結構的完整性(因為遺傳信息全部儲存在核酸一級結構中,故完整的一級結構是保證核酸結構與功能研究的基層)。
  2、排除其它分子(如蛋白質、多糖,、脂類、有機溶劑等)的污染,使下游試驗順利進行。
  試劑盒提取的原理和方法
  DNA與組蛋白構成核小體,核小體纏繞成中空的螺旋管狀結構,即染色絲,染色絲再與許多非組蛋白形成染色體。染色體存在于細胞核中,
  外有核膜及胞膜。從組織中提取DNA必須先將組織分散成單個細胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色體釋放出來,同時去除與DNA結合的組蛋白及非組蛋白。
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